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淺談PCR 基本反應(yīng)原理

來(lái)源：上海博湖生物科技有限公司 >> 進(jìn)入該公司展臺(tái) 2022/01/06 15:07:09 已瀏覽：次

導(dǎo)讀:淺談PCR 基本反應(yīng)原理

從*的角度來(lái)說(shuō)，PCR 由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：

1、模板 DNA 的變性：模板 DNA 經(jīng)加熱至 94℃ 左右一定時(shí)間后，使模板 DNA 雙鏈或經(jīng) PCR 擴(kuò)增形成的雙鏈 DNA 解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備；

2、模板 DNA 與引物的退火（復(fù)性）：模板 DNA 經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至 55℃ 左右，引物與模板 DNA 單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；

3、引物的延伸：DNA 模板--引物結(jié)合物在 Taq 酶的作用下，以 dNTP 為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板 DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。

重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程，就可獲得更多的「半保留復(fù)制鏈」，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需 2～4 分鐘， 2～3 小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。

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